一、为什么需要进行柱平衡？· 置换色谱柱内储存的溶剂· 在流动相和固定相之间建立平衡· 湿润固定相以实现分析物的分配· 产生可靠的结果。二、色谱柱没有平衡好会产生何种影响？·基线波动·保留时间变化·峰形变形·分离度变差·响应异常·产生鬼峰。三、哪些因素影响色谱柱平衡？- 固定相性质：具有庞大基团或空间位阻的固定相（例如苯基柱）可能需要更长的柱平衡时间。- 表面积：具有较低表面积的固定相有利于更快的柱平衡。- 孔径大小：具有较宽孔径（因此表面积较低）的固定相有利于更快的柱平衡。-流动相组成：具有较高浓度的缓冲盐和离子对试剂的流动相需要更长的平衡时间。-水相的比例：如果流动相中的水相含量较高，柱平衡时间可能较长。-柱温：较高的柱温会加速柱平衡，因为分子运动加快（黏度降低）。-梯度洗脱中的缓冲盐浓度：通过在两个流动相瓶中加入缓冲盐溶液，以保持洗脱过程中缓冲盐浓度的稳定，有助于加快洗脱过程中的柱平衡速度。注意：在平衡过程的开始阶段应避免使用缓冲盐：有机相，而是使用比例相符的水：有机溶剂，然后再使用初始流动相平衡。